oligodT磁珠提取mRNA

★ BioMag -Oligo(dT)包被磁珠

一、产品简介

Oligo(dT)磁珠是百迈格生物开发的一款用于杂交提取mRNA**顺磁单分散的磁珠，其表面共价偶联了寡聚dT序列，利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之间的碱基配对，可以从真核总RNA或者细胞、动植物组织中快速分离高纯度完整mRNA。所分离的mRNA可以直接用于分子生物学中的大多数下游应用：RT-PCR、固相cDNA文库构建、S1核酸酶分析、核糖核酸酶保护分析、引物延伸、点杂交和槽杂交、体外扩增实验、RACE、消减杂交。Northern分析、基因克隆和基因表达分析。由于低聚物dT与磁珠表面共价结合特性，因此Bio Mag Beads oligo(DT)可以重复使用（原则上不建议回收反复利用，以避免交叉污染和影响下游实验）。

二、产品描述：

配体

Oligo(dT)

磁珠表层材料

**顺磁亲水高分子磁珠

包装

2ml、10ml  

粒径大小

1μm

浓度

5mg/ml

结合量

≈10μg的mRNA/10mg磁珠

货号

BMDT1000-1ml、BMDT1000-5ml


建议pH使用范围

1-9

沉降系数

2mg/ml磁珠在60ul以下体积沉降时间应该不大于10s

磁珠保存液

10mM PBS, 0.09%sodium azide，pH=7.4。

保存

4℃，禁止冷冻，使用前请充分混匀

批号

Lot:

保存期

2-8℃保存，保质期三年，请于   年  月  日前使用。

注意事项

1.所有buffer在使用前要预冷到2-8℃。

2.要保证磁珠分散在溶液中，严禁磁珠干燥，会影响磁珠的分散和结合能力。

3.磁吸附后移除上清的步骤，必须完全移除掉所有上清。

4.我们建议提取到的mRNA立即用于RT-PCR。如果需要保存，建议洗脱液中添加RNase抑制剂，将mRNA从磁珠上洗脱下来并且冻存

5.避免污染，在操作过程中请佩戴一次性手套，避免接触其他污染物，并且建议多次更换手套，所有用于mRNA提取的buffer和耗材都应该是无核糖核酸酶的。



三、缓冲液配制


Binding Buffer

20 mM Tris-HCl, pH 7.5, 1.0 M LiCl, 2 mM EDTA.

Lysis/Binding Buffer

100 mM Tris-HCl, pH 7.5, 500 mM LiCl, 10 mM EDTA, 1% LiDS, 5 mM dithiothreitol (DTT)，如果发现沉淀，加热并且摇动溶解至澄清。

Washing Buffer A

10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA, 0.1% LiDS.

Washing Buffer B

10 mM Tris-HCl, pH 7.5, 0.15 M LiCl, 1 mM EDTA 10 mM Tris-HCl, pH 7.5.

注：如果提取后的mRNA不马上使用，请在洗脱液中添加RNase抑制剂，冷冻保存。

四、操作步骤

具体操作步骤见说明书